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生产工艺

使用循环肿瘤细胞(CTC)(1)作为替代肿瘤来源的疾病提供用于理解基本肿瘤生物学,指导治疗干预,和监测疾病进展的电势的非侵入性诊断溶液的分子谱的。不像循环肿瘤的DNA或RNA(2),其被高度分散,通过大量背景复合,CTC的容纳完整的基因组DNA和RNA,从而提供关于其所源自肿瘤更多的遗传信息。最近,研究重点已经从捕获和CTC的枚举,而代之以对方法,使单一和集中的CTC(3-9)的深入mRNA分布逐渐远离。例如,转录组分析,用全长mRNA测序在单CTC水平与两个前列腺癌和黑色素瘤的CTC进行,提供了窥探到疾病(4,5)的深入生物学。具有单CTC mRNA的测定法,其被限制于相对低的量的RNA,其被耦合以在临床敏感下游分子谱表现出更大的平移潜在CTC的富集池进行比较。到目前为止,合并的CTC已被用于检测肝细胞癌(HCC)(6),预测治疗反应和在前列腺癌(7)早期传播,并监测在黑素瘤(8)到免疫检查点治疗的早期应答。我们还大量发掘汇集-CTC mRNA分布,以便早期发现转移性前列腺癌(9)的。然而,为了探索汇集-CTC的mRNA,技术挑战,包括[由非特异性的白血细胞(白细胞)的结合从污染]和mRNA的寿命短富集CTC的纯度低的诊断应用,必须解决的问题。因此,关键是要开发对统筹-CTC基因检测优化的新平台。这样的平台必须能够(ⅰ)捕捉和释放与最小背景WBC污染和(ii)快速并轻轻回收保存完好的mRNA,以便它可以被无缝地加上灵敏可靠下游分子分析合并的CTC汇集的CTC。